تحميل الأطروحة
عنوان الأطروحة: دراسة بعض سلالات Pseudomonas spالمعوزة للحديد و المعزولة محليا من الريزوسنير : إنتاج السيدروفورات و الكشف عنها و تحديد بعض خصائصها الحيوية

مجال البحث: علوم طبيعية والحياة

الشعبة: بيولوجيا

تخصص: الميكروبولوجيا : فزيولوجيا بكترية

من إنجاز: جيباوي رشيد

تاريخ المناقشة: 2007

تحت إشراف: بن سلطان أحمد، أستاذ، جامعة وهران

رئيس لجنة المناقشة: بلخوجة مولاي،أستاذ، جامعة وهران

عضو مناقش رقم 1: قشي عبد الهادي،أستاذ، جامعة فرحات عباس-سطيف

عضو مناقش رقم 2: عواس عبد القادر، أستاذ، جامعة وهران

عضو مناقش رقم 3: بركاني عبد الله، أستاذ، جامعة عبد الحميد ابن باديس- مستغانم

الملخص
يعتبر الحديد عنصرا ضروريا لكل الخلايا الحية ما عدا البكتريا التي من جنس lactobacillus و بالرغم من وفرته في الطبيعة إلا أنه ليس متاحا لهذه الأحياء في الشروط الفسيولوجية . هذا و تلجأ الأحياء الدقيقة و بعض النباتات للحصول على هذا العنصر إلى إفراز ما يعرف بالسيدروفورات .و هي عبارة عن مركبات منخفضة الوزن الجزيئي ذات ألفة عالية نحو الحديد الثلاثي ( fe(IIIقمنا في هذه الدراسة بعزل 121 عزلة pseudemonas من منطقة الريزوسفير لبعض النباتات . و صنفت هذه البكتريا بالطرق الظاهرية و الفزيولوجية حيث تبين سيادة النوعين pseudemonas fluorescens-putida . تم تحديد العزلات الأكثر أهمية في التنافس على الحديد بتضخيم القطعة المورثية بتقنية التفاعل التسلسلي للبوليميراز (PCR) و قراءة التتابع لل ADNالمشفر للمورثة الموافقة ل ARN 16S و سمحت بتشخيص السلالات إلى pseudemonas putida strain ATCC 17514 و pseudemonas fluorescens- و pseudemonas sp.PH10 و pseudemonas sp.IBUN N2103 . أظهرت تفاعلات الكشف عن السيدروفورات نتيجة موجبة مع إختيار ال CAS و اتضح من إختيارCsaky و Arnow أن السيدروفورات المنتجة هي من نوع هيدروكسمات . بإستعمال تقنية الSDS-PAGE تم الكشف عن وجود مستقبلات غشائية عند إنماء البكتريا في وسط ذو عوز للحديد . كما بين إختبار التعايش الحيوي إمكانية إستعمال بعض السلالات لسيدروفورات السلالات الأخرى . تم الحصول على أعلى مردود للسيدروفورات في وسط السكسينات و توقف إنتاج السيدروفورات بشكل تام في وجودug/ml 200 من الحديد بينما كان الإنتاج أفضل فيما دونug/ml 160 من هذا العنصر . عند دراستنا لتأثير بعض مثبطات النمو على إنتاج السيدروفورات لاحظنا أن كل من البنسلين و الرصاص زادا من إنتاج السيدروفورات في وجود وفرة من الحديد كما لاحظنا أيضا أن mg/l0.20 من a- dipyridyl،a ترفع الإنتاج بشكل واضح . أما الستربتوميسين و 8-hydroxyquinoline و الزئبق و الكادميوم فكلها أثرت سلبيا على إنتاج السيدروفورات . أظهرت البيوفردينات النقية المستخلصة من ثلاث سلالات منتخبة أطياف امتصاص بذروتين واحد فيnm 400 وهي تشبه تلك التي أظهرتها الدراسات الأخرى . ثابت استقرار البيوفردينات يتراوح ما بين x1.56 1024 و x1.80 1024 عندpH = 7 . هذا و أوضح إختبار IEF إختلافا بين البيوفردينات الثلاث مما يجعل السلالات الثلاث تنتمي إلى أنماط سيدروفورية siderovars مختلفة كما تختلف أيضا عن الأنماط المرجعية الموجودة لحد إنجاز هذا العمل . قامت البيوفردينات المستخلصة بتحفيز نمو السلالات المنتجة لها . بينما لم تحفز نمو السلالات الأخرى ما عدا السلالة p1=pfluorecens).) التي استطاعت النمو مستعملة البيوفردين الذي أنتجته البيوفردينات التي أنتجتها السلالات الأخرى . هذه السلالة عند إستعمالها لبكترة بذور العدس lens culinaris أعطت نتائج جيدة في تحفيز نمو هذا النبات . حيث أظهرت المعالجة الإحصائية عن طريق تحليل التباين و بالإعتماد على الإختيار LSD إن ثمة فروق معتبرة بين حالة إستعمال البكتريا و الشاهد البيوفردين+ البكتريا و ذالك في معظم العوامل التي تم قياسها


الكلمات المفتاحية: إنتاج السيدروفورات؛ الحديد؛ مثبطات المنو؛ البيوفردينات؛ تحفيز نمو النبات؛ Pseudomonas